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Published Online:June 26, 2018
Published Online:June 26, 2018
中文摘要: 目的：通过噬菌体展示技术构建人源单链抗体库,筛选抗IL-17的特异性抗体并鉴定。方法：通过采集35位类风湿关节炎患者的外周血淋巴细胞,提取总RNA,逆转录合成cDNA,PCR扩增人H链和L链可变区抗体基因。利用SOE-PCR法将VH和VL片段拼接成ScFv片段并插入噬菌体载体pCANTAB5E中,构建人源噬菌体单链抗体库。通过固相化的抗原对抗体库进行3轮筛选后,挑取单克隆进行phage-ELISA鉴定,筛选与抗原具有较强结合性的噬菌体克隆。结果：成功构建库容为3.5×108的噬菌体抗体库,从中筛选到5株阳性克隆,ELISA证实其对抗原IL-17具有较强的结合性及中和活性。结论：成功构建了人源噬菌体单链抗体库,从中获得具有抗IL-17的人源ScFv抗体片段,为进一步的研究和应用提供实验基础。
Abstract:
keywords:
文章编号： 中图分类号：Q813 文献标志码：
基金项目:深圳市科技创新基础研究项目(深科技创新［2013］171号)
| Author Name | Affiliation |
| 钮敏红1,闫晓霏1,吕卫东1,万晓春2 | 1.深圳大学第一附属医院 深圳市第二人民医院,广东 深圳 518035 2.中国科学院深圳先进技术研究院抗体药物研究中心,广东 深圳 518035 |
| Author Name | Affiliation |
| 钮敏红1,闫晓霏1,吕卫东1,万晓春2 | 1.深圳大学第一附属医院 深圳市第二人民医院,广东 深圳 518035 2.中国科学院深圳先进技术研究院抗体药物研究中心,广东 深圳 518035 |
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